MÖ 340 yılında Philip büyük bir Makedon ordusu topladı ve Trakya'yı işgal etti. Yokluğunda Makedonya'yı yönetme yetkisini naip olarak 16 yaşındaki İskender'e bıraktı. Ancak Makedon ordusu Trakya'nın içlerine doğru ilerlerken, Makedonya'nın kuzeydoğu sınırındaki Trak kabilesi Maedi isyan etti ve ülke için tehlike oluşturdu. İskender bir ordu toplayarak isyancılara karşı yürütür ve hızlı bir hareketle Maedi'leri yenerek kalelerini ele geçirir ve buraya Alexandropolis adını verir.
İskender, MÖ 336 yılında babası suikasta kurban gidince Makedonya kralı oldu. Yunan şehirlerinde yapılan bir toplantıda strategos (general ya da başkomutan) ilan edildi. Bu yetkiyi babasının askeri genişleme planlarını başlatmak için kullandı. MÖ 334'te Pers yönetimindeki Küçük Asya'yı işgal etti. On yıl sürecek bir dizi sefere başladı. İskender, başta Issus ve Gaugamela savaşları olmak üzere bir dizi belirleyici savaşta Perslerin gücünü kırdı. Pers Kralı Darius III'ü devirdi ve tüm Pers İmparatorluğu'nu fethetti. Bu noktada İskender'in imparatorluğu Adriyatik Denizi'nden İndus Nehri'ne kadar uzanıyordu.
MÖ 326'da Hindistan'a saldırdı ve Pencap'ta bir bölgeyi yöneten Kral Porus'u mağlup etti. Daha sonra müttefik oldular. O dönemde Hindistan yüzlerce krallığa bölünmüştü. Ordu İndus'u geçmeyi ve diğer taraftaki krallarla savaşmayı reddetti, bu yüzden İskender onları Hindistan'dan çıkardı.
İskender MÖ 323 yılında Babil'de bilinmeyen bir nedenle öldü. Zehir, cinayet ya da bir savaştan sonra ateşlendiği öne sürülmüştür. Öldüğünde, Arabistan'ın işgaliyle başlayacak olan bir dizi sefer planlıyordu. Ölümünü takip eden yıllarda, bir dizi iç savaş imparatorluğunu parçaladı. Birkaç eyalet daha sonra İskender'in hayatta kalan generalleri ve varisleri olan Diadochi tarafından yönetildi. Birbirleriyle savaştılar ve birbirlerini fethettiler. Hayatta kalan en büyük parça Seleukos İmparatorluğu oldu.
İskender'in mirası Makedon fikirlerinin ve dilinin kültürel yayılımını da içermektedir. Başta Mısır'daki İskenderiye olmak üzere kendi adıyla anılan yirmi kadar şehir kurmuştur. İskender'in Makedon kolonistleri yerleştirmesi yeni bir Helenistik uygarlıkla sonuçlandı. Bunun izleri MS 15. yüzyılın ortalarında Bizans İmparatorluğu'nda görülebilir. Orta ve Uzak Doğu Anadolu'da 1920'lere kadar Makedonca konuşanlar vardı.
Alexander öldüğünde sadece 32 yaşındaydı.
