Çiftleşme, genellikle eşeyli üreme amacıyla karşı cins veya hermafrodit organizmaların eşleştirilmesidir. Bazı tanımlar bu terimi hayvanlar arasındaki eşleşme ile sınırlarken, diğer tanımlar terimi bitkiler ve mantarlardaki çiftleşmeyi de kapsayacak şekilde genişletmektedir.
Döllenme, gametlerin birleşmesidir. Çiftleşme, cinsel olarak üreyen iki hayvanın cinsel organlarının iç döllenme için birleşmesidir.
Çiftleşme, amfibilerde, balıklarda ve bitkilerde görüldüğü gibi dış döllenmeye de yol açabilir. Çoğu tür için çiftleşme karşı cinsten iki birey arasında gerçekleşir.
Bazı hermafrodit türler için çiftleşmeye gerek yoktur çünkü ana organizma kendi kendini dölleyebilir (otogami). Bazı çiçekli bitkilerde kendi kendine tozlaşma aynı çiçek içinde gerçekleşebilir ve bazı hermafrodit hayvanlar kendi kendine döllenir. Birçok gastropod hermafrodittir ve eş zamanlı çiftleşme yaparlar. Toprak solucanları da öyle.
Bazı kuşlarda çiftleşme, yuva yapma ve yavruları besleme gibi davranışları içerir. İnsanların evcilleştirilmiş hayvanları çiftleştirme ve suni dölleme uygulamaları hayvancılığın bir parçasıdır.
